三優(yōu)生物磁陣列全人源小鼠抗體發(fā)現(xiàn)平臺重磅發(fā)布
三優(yōu)生物智能超萬億分子發(fā)現(xiàn)平臺再添新成員。在已有的全人抗體庫、共輕庫、單域庫、多肽庫、新型靶向蛋白庫等十萬億文庫的基礎(chǔ)上，三優(yōu)生物隆重推出了磁陣列全人源小鼠免疫抗體發(fā)現(xiàn)平臺（MIT-humAb）。該平臺整合多種重輕鏈全人源小鼠，通過全人源小鼠免疫、陣列化噬菌體抗體庫構(gòu)建、磁珠高通量篩選技術(shù)以及真核表達系統(tǒng)相結(jié)合的方法來制備全人抗體。針對任一靶點，該平臺可獲得數(shù)十至上百個高親和力的先導(dǎo)抗體分子，所獲抗體的親和力、序列特異性和類別豐富度等指標(biāo)均處于領(lǐng)先水平。
一、平臺背景
抗體藥物研發(fā)中，抗體發(fā)現(xiàn)是關(guān)鍵的第一步。傳統(tǒng)小鼠免疫庫技術(shù)成熟，成本相對較低，能產(chǎn)生高親和力抗體，但小鼠抗體需人源化，延長了項目周期，且可能存在人源化失敗或者免疫原性的風(fēng)險。為克服這些不足，全人源抗體轉(zhuǎn)基因小鼠應(yīng)運而生。這類小鼠免疫球蛋白可變區(qū)基因被替換為人類基因，能直接產(chǎn)生全人源抗體，無需人源化改造，降低了免疫原性風(fēng)險，并提供更高的人源抗體多樣性。隨著技術(shù)發(fā)展，全人源轉(zhuǎn)基因小鼠平臺日趨成熟，被廣泛應(yīng)用于抗體藥物研發(fā)。為了快速獲得高親和人源抗體，三優(yōu)生物隆重推出了磁陣列全人源小鼠免疫抗體發(fā)現(xiàn)平臺。該平臺利用全人源抗體小鼠免疫，可以一步產(chǎn)生高親和的人源單克隆抗體。
二、發(fā)展歷史
2016年，三優(yōu)生物作為小鼠免疫庫商業(yè)化應(yīng)用的先驅(qū)，首次提供磁陣列小鼠免疫抗體庫（Magnetic & Immunization & Tandem antibody library, MIT）構(gòu)建篩選服務(wù)。截止2025年03月，構(gòu)建2798個MIT免疫庫，累計庫容達到7.2千億，服務(wù)811個項目，共計獲得31200+個優(yōu)質(zhì)候選分子。時隔10年，隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展與小鼠模型的持續(xù)優(yōu)化，三優(yōu)生物隆重推出磁陣列全人源小鼠抗體發(fā)現(xiàn)平臺，該平臺整合全人源抗體轉(zhuǎn)基因小鼠與三大萬億級抗體文庫（天然全人源庫、半合成庫、共輕鏈文庫）鼠庫雙驅(qū)，通過多維度抗體開發(fā)路徑，突破傳統(tǒng)抗體開發(fā)瓶頸，助力客戶開發(fā)first/best-in-class抗體藥物。
三、平臺特性
特性一：免疫效價高
全人源小鼠可以產(chǎn)生正常的免疫反應(yīng)，免疫后進行效價檢測可以產(chǎn)生較高的效價。對非人源和全人源小鼠進行小鼠免疫，取四次免疫后的血清進行效價檢測，效價檢測結(jié)果如圖1所示，Mouse 1-2為非人源小鼠，Mouse 3-4為全人源小鼠，ELISA結(jié)果顯示，非人源小鼠和全人源小鼠四免的效價均可以達到36萬。與非人源小鼠相比，全人源小鼠可以產(chǎn)生正常的免疫反應(yīng)，免疫效價與非人源小鼠相當(dāng)。
▲ 圖1. 四免小鼠ELISA血清效價檢測
特性二：融合了多樣化的篩選技術(shù)，速度快
三優(yōu)生物項目經(jīng)驗豐富，可針對不同靶點類型制定個性化方案。首先在原材料制備與鑒定階段，重組His或Fc融合蛋白、mRNA、高表達腫瘤細(xì)胞、多肽、VLP等均可作為篩選原材料。小鼠免疫階段，共有三種全人源小鼠供選擇：Babl/c、CD1和SJL；采用多種抗原、多種佐劑、多種免疫方法，輔以多種方式的篩選策略，更易獲得多樣化抗體分子。其次在抗體庫海選及篩選階段，可采用固相海選、液相海選、固相液相交叉海選、細(xì)胞海選、蛋白細(xì)胞交叉海選、競爭海選等方式，確保每個靶點平均可獲得數(shù)十到上百個先導(dǎo)抗體分子。最后在真核表達驗證階段，可針對獲得的優(yōu)選分子進行初步的成藥性分析，如：SDS-PAGE、SEC、LC-MS、ELISA、FACS和親和動力學(xué)等生化理化檢測驗證分子質(zhì)量。
▲ 圖2. 三優(yōu)全人源小鼠抗體發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)解決方案
特性三：高通量篩選
三優(yōu)生物將“噬菌體展示抗體庫技術(shù)”與“全人源小鼠免疫平臺”深度融合，構(gòu)建了一個高度自動化、高通量且精準(zhǔn)的一站式篩選平臺。經(jīng)過多的持續(xù)優(yōu)化，三優(yōu)生物成功建立了全自動化的實驗體系，基于陣列化建庫與液相篩選相結(jié)合的一站式高通量自動化篩選技術(shù)，大幅縮短了篩選周期，顯著提升了篩選效率，僅僅21天就可以完成文庫篩選及真核表達初步驗證，還顯著提高了篩選通量和整體效率，為藥物研發(fā)提供了強有力的技術(shù)支持。
四、代表案例
1、抗原背景
Target A是一種免疫檢查點蛋白，于1994年首次在小鼠中發(fā)現(xiàn)，主要表達于活化的T細(xì)胞、B細(xì)胞和髓系細(xì)胞表面。該蛋白通過與配體結(jié)合，抑制T細(xì)胞的激活和增殖，防止免疫系統(tǒng)過度反應(yīng)（避免自身免疫損傷）。腫瘤細(xì)胞通過高表達配體，與T細(xì)胞上的Target A結(jié)合，抑制免疫攻擊，形成“免疫抑制微環(huán)境”。
目前，已有多加公司研發(fā)針對Target A的抑制劑，用于包括黑色素瘤、非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）、腎癌、頭頸癌、胃癌等腫瘤疾病的治療。
2、抗體發(fā)現(xiàn)技術(shù)路線
為了產(chǎn)生對Target A特異性識別的抗體，利用磁陣列全人源小鼠免疫抗體發(fā)現(xiàn)平臺，篩選出多組能夠與Target A特異性結(jié)合的候選抗體，具體的篩選流程見圖3。
▲ 圖3. 抗Target A抗體發(fā)現(xiàn)的篩選流程
3、抗體發(fā)現(xiàn)關(guān)鍵結(jié)果
為了驗證候選抗體的結(jié)合活性，采用ELISA對篩選后的抗體進行檢測，結(jié)果如圖4所示，A1-A8是篩選后的候選抗體，Bench marker為陽性對照，NC為陰性對照。A1-A8顯示出了與對照抗體Bench marker相當(dāng)或更好的結(jié)合活性。通過三優(yōu)全人源小鼠免疫庫篩選獲得的候選分子具有較好的結(jié)合活性。
▲ 圖4. 候選分子ELISA結(jié)合檢測
五、展望
三優(yōu)生物磁陣列全人源小鼠抗體發(fā)現(xiàn)平臺將助力國內(nèi)外藥企和醫(yī)療機構(gòu)產(chǎn)生針對各種疾病靶點的高親和力、高特異性抗體，在腫瘤免疫治療、自身免疫疾病研究及感染性疾病防控等領(lǐng)域發(fā)揮日益重要的作用。同時，結(jié)合人工智能和高通量篩選技術(shù)，將能更快速地識別和優(yōu)化候選抗體，從而顯著縮短藥物開發(fā)周期，為全球患者帶來更多治療選擇。
關(guān)于三優(yōu)生物
三優(yōu)生物是一家以“運用創(chuàng)新生物藥提高人類的生活品質(zhì)”為愿景，以“讓天下沒有難做的創(chuàng)新生物藥”為使命的生物醫(yī)藥高新技術(shù)企業(yè)。公司總部位于中國上海，在美國、歐洲等地設(shè)有子公司，現(xiàn)有投產(chǎn)及布局的研發(fā)及GMP場地20000多平方米。
公司以智能超萬億分子庫為核心，打造了國際領(lǐng)先的創(chuàng)新生物藥臨床前智能化及一體化研發(fā)平臺，通過“新藥發(fā)現(xiàn)、臨床前研究、智能化藥物研發(fā)及前沿科學(xué)研究”等四個維度加速創(chuàng)新生物藥物的研發(fā)進程。
公司為合作伙伴提供“差異化CRO、整合型CDO、協(xié)同型CPO、特色CRS”于一體的“創(chuàng)新生物藥4C綜合業(yè)務(wù)”。公司已建立全球營銷網(wǎng)絡(luò)，已與全球1200多家藥企、生技公司等建立了良好的合作關(guān)系；已完成了1200多個新藥發(fā)現(xiàn)及開發(fā)服務(wù)項目；已完成了50多個合作研發(fā)項目，其中9個合作項目已完成臨床申報；公司開發(fā)了數(shù)千種品牌試劑。
公司已獲得國家高新技術(shù)、上海市專精特新、上海市小巨人和上?！皬埥恰逼髽I(yè)認(rèn)定。
